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Bodian染色法是美国科学家David Bodian 1936年首创的用于观察神经元、轴突和树突内神经原纤维的浸银染色法，其工作原理是把石蜡切片浸于银溶液中，再用还原液使银颗粒沉积于神经纤维上并呈棕色或棕黑色。传统Bodian法的染色是在37℃进行，Clark改良法将温度改为60℃。

• 一站式，用户不需要单独购买和配制各种溶液。
  
• 降低了背景色深，减轻了血管和胶原纤维的共染现象，便于观察神经纤维。
  
• 染色和还原时间更短，降低了脱片现象。
  
• 本试剂盒可用于细胞涂片、切片和实体组织的显色检测。
  
• 产品稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀。
  
• 本制品只能用于科研。

1. 配制蛋白银溶液：在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入10mL蒸馏水，再将蛋白银研磨成粉，称取0.1g然后慢慢抖入到培养皿中，让蛋白银干粉在静止状态下缓慢溶解进入水中，期间不要摇晃，直到彻底溶解。
   
   • 蛋白银溶液必须现配现用。
     
   • 以配制10mL为例，10mL足够10张切片。
2. 配制还原液：称0.5g还原液成分一和0.1g还原液成分二，加自备蒸馏水10mL溶解即可。
   
   • 此溶液必须现配现用。
     
   • 以配制10mL为例，10mL足够10张切片。
   • 本试剂盒提供的10mL试剂瓶可以反复使用。
3. 配制氯化金1%溶液：在本试剂盒提供的125mL塑料瓶中加入100mL自备蒸馏水，再加入1g氯化金溶解待用。由于氯化金吸湿性非常强，一旦打开包装瓶，必须一次全部溶解。可以分装成小份，每份10mL，冻存，每次只取10mL使用，10mL足够10张切片。
   
   • 塑料瓶可以重复使用。
4. 配制草酸溶液：在本试剂盒提供的10mL塑料瓶中加入10mL自备蒸馏水，再加入0.2g草酸溶解待用。10mL本溶液足够处理10张切片。
   
   • 塑料瓶可以重复使用。
5. 配制固定液：在本试剂盒提供的10mL塑料瓶中加入10mL自备蒸馏水，再加入0.5g固定剂溶解待用。10mL本溶液足够处理10张切片。
   
   • 塑料瓶可以重复使用。

6. 固定组织并制备厚度为10～15μm的切片。制备切片时最好使用自备的Bodian专用固定液（甲醛原液5mL、冰乙酸5mL、80%乙醇90mL），但本染色法也跟其他常用的各种固定液兼容。
   
   • 本试剂盒不提供固定液。
7. 将切片脱蜡至水。
   
8. 在Coplin染色缸中加入10mL第1步新鲜配制的蛋白银溶液，然后加入一张新鲜处理的铜箔（处理方法：在干净的培养细菌的玻璃培养皿中加入7mL水和3mL自备硝酸，混匀，用镊子将一片铜箔（约0.5g）浸入到硝酸溶液中，硝酸溶液将去除其表面的氧化层，当铜箔表面变成金黄色时用镊子取出铜箔并迅速用自来水冲洗干净，折叠到适当大小并放入到装有蛋白银溶液的Coplin染色缸底部），然后放入切片，将染色缸密封后放60℃温箱内染色4～16小时（或37℃染色24～48小时）。如果选择60℃染色，最好每1小时肉眼检测一次，当切片呈金棕色时即停止染色。如染色时间太短，只有较粗的纤维可被轻微的染上，如果染色过头则会产生过深背景。
   
9. 用蒸馏水稍洗一下切片，洗去切片表面的染料。洗的时间不宜太长，否则会把染色去掉，只留下已被浸染的粗纤维。
   
10. 把切片放入新制备的还原液中还原2～3分钟。
    
11. 用蒸馏水彻底洗去还原液。
    
12. 在1mL1%氯化金溶液中加入1.5μL冰乙酸，混匀。将切片放入此1%氯化金溶液中调色10分钟。
    
13. 用蒸馏水洗净。
    
14. 如果此时切片呈淡紫色或蓝色则跳过此步，如果还不呈淡紫色，则将切片放入到草酸溶液中2～5分钟，直到切片呈浅紫色或蓝色时取出。
    
15. 用自来水冲洗切片5分钟。
    
16. 将切片放在固定液中固定5分钟。
    
17. 自来水洗净切片。
    
18. 对切片进行梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封固
    
    • 本试剂盒不含相关试剂。
19. 显微观察切片：轴突、神经元纤维将呈现黑色或紫黑色。